2.1.4. METHODE

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Réalisation Du Test Sur Le BEP® II :
- Déposer 100  de sérum de contrôle négatif dans les 3 premières cupules (A1 à C1) ;
- Ajouter 100  de sérum de contrôle positif dans les 2 cupules suivantes (D1 et E1) ;
- Ajouter 100  de chacun des échantillons non dilués dans les autres cupules (2) ;
- Enchaîner la distribution du Conjugué 1 immédiatement après celle des échantillons ;
- Distribuer dans chaque cupule 25  de Conjugué 1 (Anti-HBs/Biotine) ;
- Couvrir ensuite d’une feuille adhésive
- Immédiatement après la distribution du Conjugué placer la plaque dans l’incubateur ;
- Laisser incuber 60 ± 2 min à +37 ±1  ;
- Enchaîner immédiatement le processus de lavage, en retirant la feuille adhésive ;
- Aspirer le contenu de toutes les cupules ;
- Distribuer dans chacune des cupules environ 0.3 ml de Solution de lavage ;
- Répéter 4 fois l’opération, en respectant un temps de contact de 10 sec ;
- Dés la fin du lavage, distribuer immédiatement le Conjugué 2 afin d’éviter tout desséchement ;
- Distribuer 100  du Conjugué 2(Streptavidine/POD) dans chaque cupule ;
- Couvrir d’une nouvelle feuille adhésive, et placer immédiatement la plaque dans l’incubateur.
- Laisser incuber 30 ± 2 min à 37 ±1,
- Enchaîner immédiatement le processus de lavage, en retirant la feuille adhésive ;
- Aspirer le contenu de toutes les cupules ;
- Distribuer dans chacune des cupules environ 0.3 ml de Solution de lavage ;
- Répéter 4 fois l’opération, en respectant un temps de contact de 10 sec ;
- Dés la fin du lavage, distribuer immédiatement le Substrat afin d’éviter tout desséchement ;
- Distribuer dans chaque cupule 75  de la Solution d’emploi du Chromogène ;
- Couvrir la plaque d’une nouvelle feuille adhésive ;
- Laisser incuber le Substrat 30 ± 2 min à +15/+25, à l’abri de la lumière ;
- Pour arrêter la réaction, retirer la feuille adhésive et ajouter dans chaque cupule 75  de Solution
d’arrêt POD en respectant le même rythme qu’en 9 ;
- Pour faire une mesure photométrique dans l’heure qui suit à 450 nm, la longueur d’onde de référence doit
être de 650 nm (éventuellement comprise entre 615 et 690 nm).

Si le photomètre nécessite un réglage sur zéro, utiliser la Solution d’arrêt POD en respectant les
instructions données par le fabricant.

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